Intradermal comparative cervical tuberculin test in the diagnosis of caprine tuberculosis.

Tuberculosis remains one of the most important infectious diseases with well-known zoonotic nature that affect humans, wildlife, and domestic animals, including goats. Nonetheless, no intradermal tuberculin test has been standardized for caprine diagnosis of tuberculosis. The present study investigated the intradermal comparative cervical tuberculin test (ICCTT) in the diagnosis of tuberculosis among 60 goats from farms with history of tuberculosis. The cutoff applied to goats was based on a study where goats had been experimentally infected with Mycobacterium bovis and Mycobacterium avium. Clinical examination, bacteriological culture, and histopathological staining were assessed to the diagnosis. Isolates compatible with mycobacteria were subjected for molecular diagnosis based on gyrB-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis and PCR restriction-enzyme analysis (PRA) of hsp65 gene by BstEII and HaeIII, namely PRA-hsp65 assay. From all goats, 60% (n = 36/60), 3.3% (n = 2/60), and 36.7% (n = 22/60) showed positive, inconclusive, and negative reactions, respectively. Out of 36 goats with ICCTT positive, 75% (n = 27/36) had isolation of mycobacteria and were detected M. bovis by gyrB-RFLP. Molecular diagnosis and histopathological findings compatible with tuberculosis showed 86.1% (n = 31/36) concordance with the ICCTT. When compared ICCTT with M. bovis isolation, gyrB-RFLP, and histopathology, the better arithmetic means of sensitivity and specificity were 2.5 mm for ICCTT compared with M. bovis isolation and gyrB-RFLP, and 4.55 mm when compared with histopathology. Both receiver operating characteristic (ROC) curves presented statistical significance (P < 0.001). The identification of other mycobacteria, e.g., M. kansasii, M. flavescens, M. avium, M. florentinum, M. lentiflavum, M. simiae, and Corynebacterium pseudotuberculosis, not influenced positive results in ICCTT. The concordance between bacteriological, histopathological, and molecular identification with ICCTT findings indicate that the tuberculin test may be used as a valuable tool for diagnosis of caprine tuberculosis and reinforce the importance of association of methods to diagnostic of the disease from animal origin.

The Effects of Pre-Storage Leukoreduction on the Conservation of Bovine Whole Blood in Plastic Bags.

Leukoreduction (LR) is a technique that consists of reducing the number of leukocytes in whole blood or blood components that can contribute to decreasing storage lesions and the occurrence of post-transfusion complications. We propose that using a blood bag with pre-storage leukocyte filtration is sufficient for blood conservation under field conditions. Ten healthy Nelore cows were used. Whole blood was sampled from each animal and stored at 2 to 6 °C in CPD/SAG-M (citrate phosphate dextrose bag with a saline, adenine, glucose, mannitol satellite bag) triple bags (Control) and in CPD/SAG-M quadruple bags with a leukocyte filter (Filter). At baseline and after 7, 14, 21, 28, 35, and 42 days (D0, D7, D14, D21, D28, D35, and D42, respectively), complete hematological, blood gas, and biochemical evaluations were determined. The filtered bag removed 99.3% of white blood cells from cattle blood, and the entire filtration process was performed in the field. There was a reduction in the number of red blood cells (RBCs) in both groups from D14 onward, with a decrease of 19.7% and 17.1% at D42 for the Control and Filter bags, respectively. The hemoglobin (Hb) concentration had variation in both groups. Potassium, pO2, pCO2, and sO2 increased, and sodium, bicarbonate, and pH decreased during storage. The filtered bag was efficient in removing white cells from cattle whole blood and could be used under field conditions. Blood stored after LR showed differences (p < 0.05) in blood gas analysis towards a better quality of stored blood (e.g., higher pH, lower pCO2, higher sO2). Further experimental studies are required to prove that blood without white cells results in a decrease in transfusion reactions in cattle.

Evaluation of infrared thermography, force platform and filmed locomotion score as non-invasive diagnostic methods for acute laminitis in zebu cattle.

This study aimed to characterize oligofructose-induced laminitis in zebu cattle and comparatively evaluate four different diagnostic methods for laminitis. A total of 29 rumen-cannulated Nelore heifers, weighing 474.5 ± 58.5 kg were used. Laminitis was experimentally induced by intraruminal administration of 0.765 g/kg oligofructose twice daily for three consecutive days, followed by a single dose of 10.71 g/kg oligofructose on the fourth day. The animals were evaluated before administration of the highest dose of oligofructose (basal) and every six hours for up to 24 hours (6, 12, 18, 24 hours) and thereafter, every 12 hours for up to 72 hours (36, 48, 60, 72 hours) post-induction. The following diagnostic methods were used: hoof pain sensitivity test (hoof-testing), locomotion scoring, hoof infrared thermography, and force platform. Diagnosis of laminitis was confirmed after two positive responses to hoof pressure testing. Using a receiver operator characteristic (ROC) curve, we defined the appropriate cut-off for infrared thermography and force plate as 30 °C and < 24%, respectively. From the 29 heifers, 27 developed laminitis (93.1%) which occurred between 24 h to 72 h in the digits from two limbs, with more frequent sensitivity in the lateral digits. Locomotion analysis detected twenty-eight heifers with laminitis and showed that a greater (P = 0.006) number of animals had lameness in two limbs (n = 13; 56%). Using hoof-testing as gold standard for the diagnosis of laminitis the locomotion score displayed 100% sensitivity, 97% specificity and 98% accuracy; infrared thermography showed 96% sensitivity, 63% specificity, and 75% accuracy whilst force plate had 76% sensitivity, 82% specificity and 79% accuracy. This suggests that, for the diagnosis of laminitis in cattle, pain evaluation is more efficient. Considering the difficult to evaluate pain sensitivity in Nelore animals, filmed locomotion score, infrared thermography and force plate methods can be indicated for non-invasive lameness detection in beef farms.

Cryptococcus gattii molecular type VGII infection associated with lung disease in a goat.

BACKGROUND: Cryptococcus gattii-induced cryptococcosis is an emerging infectious disease of humans and animals with worldwide distribution and public health importance due to its significant morbidity and mortality rate. The present study aimed to report a case of pulmonary infection by C. gattii molecular type VGII in State of São Paulo, Brazil. CASE PRESENTATION: A 5-year-old goat showing intermittent dry cough, ruminal tympany, anorexia, fever, tachycardia and tachypnea was presented for necropsy at the Veterinary Hospital of the School of Veterinary Medicine and Animal Sciences, São Paulo University, São Paulo, Brazil. Postmortem examination revealed numerous 2.0-6.0 cm diameter yellow gelatinous pulmonary masses. Tissues were evaluated by a combination of pathological, mycological, and molecular diagnostic techniques. Microscopically, pneumonia granulomatous, multifocal to coalescing, moderate, with many intralesional carminophilic yeasts was observed. The immunohistochemistry and mycological culture confirmed Cryptococcus spp. Internal transcribed spacers and orotidine monophosphate pyrophosphorylase nucleotide differentiation demonstrated that the isolate corresponds to the C. gattii VGII molecular subtype. CONCLUSIONS: To our knowledge, this is the first report of a pulmonary infection in a goat linked to C. gattii molecular type VGII in Southeastern Brazil. Our findings emphasize the need for an active surveillance program for human and animal new infections to improve the current public health policies due to expansion of the epidemiological niche of this important microorganism.

Avaliação funcional dos fagócitos do sangue e da secreção mamária de vacas no período pós-parto imediato / Functional assessment of phagocytes from blood and mammary secretion of cows in the immediate postpartum period

The peripartum is characterized by immune and physiological changes in the mammary glands of cows, making them more susceptive to mastitis. This work aimed to evaluate the phagocytosis of Escherichia coli by phagocytes from blood and colostrum from healthy Holstein cows. Samples from 22 female, heifers and cows, were obtained during the first postpartum milking for evaluation of phagocytosis in glass cover slip, after stimulation with E. coli. The proportion of spreading blood phagocytes was higher when cells were stimulated with bacteria (p=0.003). However, the phagocytosis rate was low and similar to that observed when blood cells were unstimulated (p=0.299). Colostrum showed higher rates of spreading (p=0.000) and phagocytosis (p=0.001) when phagocytes were stimulated with E. coli. Comparing the results obtained for blood and colostrum, a higher proportion of not spreading phagocytes without bacteria inside, when stimulated (p=0.000) or not (p=0.002) with bacteria, was observed in blood. There was a higher spreading rate in colostrum when phagocytes were stimulated with E. coli (p=0.002). There was no difference in the percentage of phagocytosis in blood or colostrum samples incubated (p=0.478) or not (p=0.071) with bacteria. The results showed that E. coli influenced the activity of blood and colostrum phagocytes from Holstein cows in the immediate postpartum period, and will assist in the understanding of the immunological mechanisms that occurs in this period, considered as the most susceptible to infections in cows.

O periparto caracteriza-se por mudanças imunes e fisiológicas na glândula mamária das fêmeas bovinas, ­tornando-as mais susceptiveis às mastites. Este trabalho teve o objetivo de avaliar a fagocitose da bactéria Escherichia coli pelos fagócitos do sangue e do colostro de vacas hígidas da raça Holandesa. Amostras provenientes de 22 fêmeas, entre novilhas e vacas, foram obtidas durante a primeira ordenha pós-parto, para avaliação da fagocitose, em lamínula de vidro, após estímulo com E. coli. A proporção de fagócitos espraiados do sangue foi maior quando as células foram estimuladas com bactérias (p=0,003), no entanto a taxa de fagocitose foi baixa e semelhante à observada quando as células não foram estimuladas (p=0,299). No colostro, foram constatados maiores índices de fagocitose (p=0,001) e espraiamento (p=0,000) quando os fagócitos foram estimulados com E. coli. Comparando-se os resultados obtidos para o sangue e o colostro, verificou-se, no sangue, maior proporção de fagócitos não espraiados e que não apresentavam bactérias no seu interior, estimulados (p=0,000) ou não (p=0,002) com bactéria. Houve maior taxa de espraiamento nos fagócitos do colostro quando estimulados com E. coli (p=0,002). Não se viu diferença nos percentuais de fagocitose entre as amostras de sangue e colostro incubadas (p=0,478) ou não (p=0,071) com bactérias. Os resultados permitiram concluir que E. coli influenciou no espraiamento dos fagócitos do sangue e do colostro de fêmeas bovinas da raça Holandesa no período do pós-parto imediato e auxiliarão na compreensão dos mecanismos imunológicos ocorridos nesse período, considerado o de maior susceptibilidade das fêmeas bovinas às infecções.

Power Doppler sonography in the assessment of neovascularization following surgical fracture repair in sheep: case report / Utilização da ultrassonografia Power Doppler no acompanhamento de neovascularização no pós-operatório de ovino submetido a osteossíntese: relato de caso

Sonography is a safe and non-invasive imaging modality, with the added benefit of providing dynamic images. Power Doppler sonography allows blood vessel identification regardless of flow intensity or direction. A one-year-old Ile de France ewe was admitted to the FMVZ-USP Veterinary Hospital with a complete tibial fracture. The animal was submitted to general inhalation anesthesia and fracture repair using a 3.5 mm locking compression plate. Power Doppler sonography was used to assess neovascularization over the course of the bone healing process. Formation of new vessels was noted between postoperative days 14 and 21; new vessels regressed progressively on subsequent assessments (postoperative days 28 and 35). Power Doppler sonography enabled early detection of newly formed blood vessels at the fracture site. The non-invasive nature of this imaging modality prevented patient stress and provided useful information on the progression of bone healing. Early neovascularization was thought to reflect successful postoperative healing of the tibial fracture described.(AU)

A ultrassonografia é técnica de imagem segura e não invasiva que fornece imagens dinâmicas. O Power Doppler é modalidade ultrassonográfica que permite a visualização de vasos sanguíneos sem depender de intensidade e direção de fluxo. Admitiu-se no Hospital Veterinário da FMVZ-USP um ovino fêmea, de raça Ile de France, com um ano de idade e apresentando fratura completa de tíbia em bisel. O animal foi submetido à anestesia inalatória para a realização de osteossíntese com placa bloqueada de 3,5 mm. Durante o período pós-operatório foram realizadas imagens de ultrassonografia Power Doppler para a avaliação da neovascularização ao longo do processo de regeneração óssea. Entre o 14º e o 21º dia do período pós-operatório, identificou-se a presença de vasos sanguíneos neoformados, que apresentaram sinais de regressão nas avaliações subsequentes (realizadas no 28º e no 35º dia pós-operatório). A ultrassonografia Power Doppler mostrou-se eficiente na detecção precoce de vasos sanguíneos neoformados na região da fratura no período pós-operatório, sendo um exame não invasivo, que não gerou estresse para o animal e que pode estar relacionado ao sucesso no reparo ósseo da tíbia do animal submetido à osteossíntese.(AU)

Avaliação funcional dos fagócitos do sangue e da secreção mamária de vacas no período pós-parto imediato / Functional assessment of phagocytes from blood and mammary secretion of cows in the immediate postpartum period

O periparto caracteriza-se por mudanças imunes e fisiológicas na glândula mamária das fêmeas bovinas, ­tornando-as mais susceptiveis às mastites. Este trabalho teve o objetivo de avaliar a fagocitose da bactéria Escherichia coli pelos fagócitos do sangue e do colostro de vacas hígidas da raça Holandesa. Amostras provenientes de 22 fêmeas, entre novilhas e vacas, foram obtidas durante a primeira ordenha pós-parto, para avaliação da fagocitose, em lamínula de vidro, após estímulo com E. coli. A proporção de fagócitos espraiados do sangue foi maior quando as células foram estimuladas com bactérias (p=0,003), no entanto a taxa de fagocitose foi baixa e semelhante à observada quando as células não foram estimuladas (p=0,299). No colostro, foram constatados maiores índices de fagocitose (p=0,001) e espraiamento (p=0,000) quando os fagócitos foram estimulados com E. coli. Comparando-se os resultados obtidos para o sangue e o colostro, verificou-se, no sangue, maior proporção de fagócitos não espraiados e que não apresentavam bactérias no seu interior, estimulados (p=0,000) ou não (p=0,002) com bactéria. Houve maior taxa de espraiamento nos fagócitos do colostro quando estimulados com E. coli (p=0,002). Não se viu diferença nos percentuais de fagocitose entre as amostras de sangue e colostro incubadas (p=0,478) ou não (p=0,071) com bactérias. Os resultados permitiram concluir que E. coli influenciou no espraiamento dos fagócitos do sangue e do colostro de fêmeas bovinas da raça Holandesa no período do pós-parto imediato e auxiliarão na compreensão dos mecanismos imunológicos ocorridos nesse período, considerado o de maior susceptibilidade das fêmeas bovinas às infecções.(AU)

The peripartum is characterized by immune and physiological changes in the mammary glands of cows, making them more susceptive to mastitis. This work aimed to evaluate the phagocytosis of Escherichia coli by phagocytes from blood and colostrum from healthy Holstein cows. Samples from 22 female, heifers and cows, were obtained during the first postpartum milking for evaluation of phagocytosis in glass cover slip, after stimulation with E. coli. The proportion of spreading blood phagocytes was higher when cells were stimulated with bacteria (p=0.003). However, the phagocytosis rate was low and similar to that observed when blood cells were unstimulated (p=0.299). Colostrum showed higher rates of spreading (p=0.000) and phagocytosis (p=0.001) when phagocytes were stimulated with E. coli. Comparing the results obtained for blood and colostrum, a higher proportion of not spreading phagocytes without bacteria inside, when stimulated (p=0.000) or not (p=0.002) with bacteria, was observed in blood. There was a higher spreading rate in colostrum when phagocytes were stimulated with E. coli (p=0.002). There was no difference in the percentage of phagocytosis in blood or colostrum samples incubated (p=0.478) or not (p=0.071) with bacteria. The results showed that E. coli influenced the activity of blood and colostrum phagocytes from Holstein cows in the immediate postpartum period, and will assist in the understanding of the immunological mechanisms that occurs in this period, considered as the most susceptible to infections in cows.(AU)

Hemogram of healthy sheep (Ovisaries) of the Santa Ines breed raised in the region of Piedade, São Paulo State: influence of age and sex / Hemograma de ovinos (Ovis aries) sadios da raça Santa Inês criados na região de Piedade, estado de São Paulo: influências etárias e sexuais

Influence of age and sex factors on blood count was investigated in healthy sheep of the Santa Ines breed, raised in the region of Piedade (São Paulo State). The hematocrit and red blood cell count presented higher values in younger females, and a gradual decrease occurred during animals' ageing. In contrast, the total number of leukocytes was lower in younger animals and showed a gradual increase with their ageing.(AU)

Foi investigada a influência dos fatores etários e sexuais sobre o hemograma de ovinos sadios da raça Santa Inês, criados na região de Piedade, no Estado de São Paulo. O hematócrito e o número de hemácias apresentaram maiores valores nas fêmeas mais jovens e houve um decréscimo gradual durante o desenvolvimento etário dos animais. Em contraposição, o número total de leucócitos foi menor nos animais mais jovens e apresentou elevação gradual com a evolução da idade dos animais.(AU)

Efeitos do estresse da orquiectomia na citologia broncoalveolar de bezerros da raça Holandesa / Effects of the stress of orchectomy on bronchoalveolar citology of Holstein Calves

A identificação do impacto que certas formas de estresse causam ao bem estar animal e equilíbrio orgânico, representa um desafio á adoção de boas práticas de criação. Assim, a presente pesquisa verificou o impacto de um desafio doloroso rotineiro dos bovinos na imunidade pulmonar e sistêmica. Avaliou-se hemograma e cortisol, em quatro momentos, sendo M1, M6, M7 e M8 (respectivamente sete dias antes e um, três e oito dias depois do desafio doloroso) e citologia broncolaveolar, obtida por broncoscopia, nos momentos M1, M6 e M8. Houve uma redução dos valores do eritrograma no primeiro dia após o desafio, compatível com anaplasmose e agravada pela perda de sangue durante a cirurgia e um influxo de leucócitos para a região pulmonar. Oito dias após o desafio, evidenciou-se aumento de cortisol, gerando uma leucocitose por neutrofilia e monocitose no sangue com provável redução de quimiotaxia para o pulmão, tornando o trato respiratório potencialmente mais susceptível a infecções, sugerindo que esta prática de manejo, mesmo acompanhado de protocolo analgésico, pode ser considerada um fator de risco a penumonias afetando o bem estar animal.

The recognition of the impact of certains forms of stress in the animal well being and organic equilibrium, represents a challenge to the adoption of good practices. Thus, this research verified the impact of a painful rotine of the cattle husbandry can cause on pulmonary and systemic immunity. Was evaluated hemogram and cortisol, in four moments, being M1, M6, M7 e M8 (respectively seven days before and one, three and eight days after the painful challenge) and bronchoalveolar cytology,obtained by bronchoscopy, in the moments of M1, M6 e M8. There was a reduction of the erythrogram values in the first day after the challenge, compatible with the anaplasmosis and aggravated by the blood loss during the surgery and an influx of leukocytes to the pulmonary region. Eight days after the challenge, became evident the cortisol increase, enerating leukocytosis by neutrophilia and monocytosis in the blood with a probable reduction of chemotaxis to the lungs, turning the respiratory tract potentially more susceptible to infections, suggesting that this practice, even accompanied by analgesic protocol, increases the risk of pneumonia, affecting the animal well-being.

Estudo retrospectivo das afecções locomotoras em ruminantes atendidos na Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo entre 2000 e 2012 / Retrospective study of locomotor disorders in ruminants attended in the School of Veterinary Medicine and Animal Science, University of São Paulo from 2000 to 2012

Foi realizado o estudo retrospectivo das afecções do sistema locomotor de ruminantes atendidos no Serviço de Clínica de Bovinos e Pequenos Ruminantes da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo (FMVZ-USP), no período de 2000 a 2012. Nesse período, foram atendidos 209 casos de animais com problemas lo- comotores, dos quais 62,7% localizados na região distal dos membros e 37,3% na região proximal. Na espécie bovina, com 121 (57,9%) casos atendidos, o comprometimento da região distal dos membros foi observado em 86 (71,07%) e da região proximal em 35 (28,93%) dos casos, respectivamente. A afecção mais frequente observada em bovinos foi a hiperplasia interdigital com 26,74% (23) dos casos atendidos. Entre as afecções na região proximal, houve maior ocor- rência de fraturas, com 48,6% (17) dos casos. Foram atendidos 88 (42,1%) pequenos ruminantes, apresentando lesões na região distal em 51,1% (45) dos casos e 48,9% (43) com lesões na região proximal. Nessas espécies, as lesões de maior ocorrência nas regiões distais e proximais foram, respectivamente, o foot-rot (60%) e as fraturas (77,4%). As afecções do sistema locomotor dos ruminantes foram pouco frequentes entre os animais atendidos no período estudado. Quanto ao prognóstico, foi bom nos animais acometidos com doenças podais, diferentemente das afecções proximais dos bovinos, principalmente fraturas, que apresentaram prognóstico mau.

This study aimed to perform a retrospective study of ruminants attended at the Clinic for Cattle and Small Ruminants (CBPR) of the Faculty of Veterinary Medicine (FMVZ), University of São Paulo (USP) with locomotor diseases from 2000 to 2012. During this period 209 cases were treated. It was found that cases located in the distal limb and in the proximal region were 62.7% and 33.7%, respectively. In bovines, 121 (57.9%) cases were treated, with 86 (71.07%) cases presented in the distal limb and 35 (28.93%) cases in the proximal region. The most common disease was interdigital hyperplasia with 23 (26.74%) cases treated. Fractures were the most frequent disease related to the proximal regioncorresponding to 17 (48.6%) occurrences. In small ruminants, 88 animals (42.1%) were treated with 45 (51.1%) cases in the distal region and the other 43 (48.9%) in the proximal region. In these species, the foot-rot (60%) and fractures (77.4%) was the most common diseases found in the distal and the proximal region, respectively. The disorders of the locomotor system of ruminants were uncommon in the CBPR. While the affected animals with claw diseases have a good prognosis, disorders affecting the upper limb in cattle, mainly fracture, have a poor prognosis.

Metabolismo oxidativo de leucócitos em animais infectados pelo Vírus da Leucemia Bovina / Oxidative burst of leukocytes from bovine leukemia Virus-Infected Cattle

A infecção pelo vírus da leucemia bovina (VLB) leva ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) ou linfossarcomas, principalmente em rebanhos bovinos leiteiros. Entretanto, os eventos que induzem tais manifestações ou o efeito da infecção na função das diferentes populações de leucócitos são pouco conhecidos. Avaliou-se o efeito da infecção pelo VLB na produção intracelular de peróxido de hidrogênio (H2O2) em leucócitos circulantes, mensurada pela fluorescência produzida pela diclorodihidrofluoresceína, utilizando-se de citometria de fluxo. As células foram obtidas de cinco vacas soronegativas; cinco vacas infectadas pelo VLB, alinfocitóticas; e cinco vacas infectadas, manifestando LP. Verificou-se que a infecção pelo VLB não altera a porcentagem de leucócitos circulantes produzindo H2O2, com ou sem prévio estímulo por adição in vitro: de 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA); de lipopolissacarídeos de Escherichia coli (LPS); ou Staphylococcus aureus. Todavia, a produção de H2O2 em leucócitos de animais apresentando LP, com ou sem estímulo, foi menor que aquela verificada em leucócitos de animais soronegativos e de animais soropositivos alinfocitóticos. Os estímulos aumentaram a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2 e a produção intracelular média em animais soronegativos ou naqueles infectados alinfocitóticos. Contudo, em leucócitos de vacas soropositivas manifestando LP, a fagocitose de S. aureus não elevou a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2. Também, apenas a adição de PMA elevou a produção intracelular de H2O2 em leucócitos de fêmeas soropositivas manifestando LP. Concluiu-se que bovinos infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam menor produção intracelular de H2O2, demonstrando vulnerabilidade funcional refletida por imunossupressão.

Widespread Bovine Leukemia Virus (BLV) infection leads to persistent lymphocytosis (PL) or lymphosarcoma, mainly in dairy herds. Nevertheless, neither the sequence of events that conducts to these symptoms, nor the effect of infection on function of different leukocyte populations, is well known. We evaluated the effect of BLV infection on immune response of cows through the analysis of hydrogen peroxide (H2O2) intracellular production of circulating leukocytes after in vitro stimuli with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS), or Staphylococcus aureus. Cells were obtained from five BLV-non infected cows, five BLV-infected, non-lymphocytotic cows, and five BLV-infected cows with PL, and analyzed by flow cytometry. Intracellular production of H2O2 was measured by dichlorodihydrofluorescein diacetate dependent fluorescence. Results showed that BLV infection does not alter the percentage of H2O2-producing circulating leukocytes (H2O2-PCL), with or without previous stimuli. However, the average of H2O2 intracellular production, with or without previous stimuli, in leukocytes obtained from cows with PL was smaller than those from cells obtained from BLV-negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Moreover, stimuli increased H2O2 intracellular production and the percentage of H2O2-PCL obtained from BLVnegative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Conversely, neither phagocytosis of S. aureus and stimulus with LPS increases H2O2 intracellular production, nor phagocytosis increases the percentage of H2O2-PCL, when leukocytes were obtained from cows with PL. Thus, results show that BLV-infected cattle, with PL, have an impaired H2O2 intracellular production, demonstrating functional vulnerability reflected by immunosuppression.

Factors affecting immunoglobulin concentration in colostrum of healthy Holstein cows immediately after delivery / Fatores que afetam o nível de imunoglobulina no colostro de vacas holandesas sadias imediatamente após o parto

This study analyzed the influence of the number of milkings, number of births, and udder quarter in immunoglobulin (Ig) concentration in the colostrum of healthy Holstein cows. It was collected two samples of colostrum by manual milking, getting the first jets to completion of bacteriological examination and immunoglobulin levels by radial immunodiffusion test in agar gel. Positive samples for bacteriological examination were excluded from this investigation. Medians of immunoglobulin's G, A and M in the colostrum collected before the first and second milking were respectively 9,200 and 6,400mg/dL (p=0.0029); 400 and 200mg/dL (p=0.0018); 800 and 400mg/dL (p=0.0001). Median immunoglobulin concentration in animals that calved once, twice or three times or in cows that calved 4 to 6 times were 6,400; 6,400; 3,200 and 11,200mg/dL IgG; 100, 200, 100 and 800mg/dL IgA ; and 400, 400, 100 and 800mg/dL IgM, respectively. Concentrations of IgG, IgA and IgM were greater in animals that calved more than 4 times (p<0.05). Medians of IgG, IgA and IgM in the right fore quarter (RF), right hind quarter (RH), left fore quarter (LF) and left hind quarter (LH) were, respectively, 7,800; 6,400; 7,800 and 6,400mg/dL; 200, 200, 200 and 200mg/dL; and 400, 400, 400 and 400mg/dL. Ig concentrations in the colostrum of Holstein cows were influenced by the number of milkings after delivery and number of lactations. These variations may be considered risk factors to passive immunity transfer to newborn calves, predisposing them to diseases and causing economic losses to dairy production.

A pesquisa avaliou a influência do número de ordenhas, número de parições e quarto mamário na concentração de imunoglobulinas (Ig) do colostro de vacas hígidas da raça Holandesa. Foram colhidas duas amostras de colostro por ordenha manual, obtendo-se os primeiros jatos para a realização do exame bacteriológico e determinação dos níveis de imunoglobulinas pelo teste de imunodifusão em gel de ágar. As amostras positivas ao exame bacteriológico foram eliminadas desta investigação. Os valores medianos obtidos para a concentração de imunoglobulinas das classes G, A e M do colostro colhido antes da primeira e segunda ordenha foram, respectivamente de 9.200 e 6.400mg/dL (p=0,0029); 400 e 200mg/ dL (p=0,0018); 800 e 400mg/dL (p=0,0001), respectivamente. Os valores medianos da concentração de imunglobulinas, nos animais com apenas 1 parto, 2, 3 ou nas vacas com 4 a 6 partos foram de 6.400, 6.400, 3.200 e 11.200mg/ dL para a IgG; 100, 200, 100 e 800mg/dL para a IgA; e 400, 400, 100 e 800mg/dL para a IgM, respectivamente. As concentrações de IgG, IgA e IgM foram superiores nos animais com mais de 4 partos (p<0,05). Os valores medianos de IgG, IgA e IgM obtidos nos quartos mamários anterior direito (AD), posterior direito (PD), anterior esquerdo (AE) e posterior esquerdo (PE) foram respectivamente 7.800, 6.400, 7.800, 6.400mg/dL; 200, 200, 200, 200mg/dL; e 400, 400, 400 e 400mg/dL, não observando-se diferenças estatísticas (p>0,05) entre os quartos mamários. Os teores de Igs do colostro de vacas Holandesas sofrem influência do número de ordenhas pós-parto e número de lactações. Estas variações podem ser consideradas fatores de risco associados à falha na transferência de imunidade passiva em bezerros neonatos, predispondo-os às doenças e ocasionando perdas produtivas á pecuária.

Efeito de medicamentos indicados para a prevenção da mastite bovina no período seco sobre a função fagocítica in vitro de leucócitos do leite de caprinos / Effect of dry cow therapy products on the in vitro phagocytic function of goat milk leukocytes

O uso de medicamentos antimamíticos específicos para vacas no período seco é indicado para prevenção de infecções na lactação seguinte. Não obstante, a ação das células envolvidas no período de secagem tem fundamental importância para a involução da glândula mamária e seu restabelecimento para a lactação subseqüente. A indisponibilidade de tais medicamentos para uso em cabras tem resultado na extrapolação do uso de produtos recomendados para vacas sem que se considerem as particularidades e diferenças anátomo-fisiológicas entre as espécies bovina e caprina. O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência de cinco antimamíticos específicos para vacas secas sobre a função dos fagócitos provenientes de leite caprino. Para tal, fez-se o isolamento de células somáticas de 20 amostras de leite provenientes de 10 cabras lactantes, sem antecedentes de tratamento de mamite nos últimos 30 dias, sob condições higiênico-sanitárias de colheita e com resultados negativos ao cultivo microbiológico do leite. As células aderidas a lamínulas de vidro foram confrontadas com formulações contendo princípios ativos disponíveis no mercado como Gentamicina (M1), Cefalônio Anidro (M2), Ampicilina (M3), Cloxacilina Benzatínica (M4) e Cefapirina Benzatínica (M5). Avaliou-se, por microscopia, a fagocitose de partículas de Zymosan. As médias dos índices de fagocitose das células submetidas ao tratamento com M2 (15,12 por cento ± 16,22), M3 (6,02 por cento ± 7,96), M4 (4,54 por cento ± 5,45) e M5 (2,47 por cento ± 4,64) foram menores (p<0,001) que a média dos índices de fagocitose do grupo controle (40,67 por cento ± 19,68). A média dos índices de fagocitose das células submetidas ao tratamento com M2 foi maior (p<0,05) que as médias dos tratamentos com M3, M4 e M5 enquanto estas foram estatisticamente iguais entre si. As amostras celulares submetidas ao medicamento M1 exibiram adesão insuficiente ou ausente às lamínulas, inviabilizando a avaliação da fagocitose ...

The use of specific anti-mastitis drugs is indicated in dry cow therapy to prevent infections in the following lactation. Nonetheless, cells active in the dry period are of fundamental importance for the involution of the mammary gland and its recovery for the following lactation. Since there are no specific drugs for dry goat therapy, the dry cow therapy drugs tend to be misused in goats despite of the anatomical and physiological differences apart from the particularities of the two species. The objective of the present study was to evaluate the influence of five drugs specific for dry cow therapy on the function of goat milk phagocytes. Somatic cells were isolated from 20 milk samples of 10 lactating goats that had not been treated for mastitis during the previous 30 days. Milk samples were collected properly and microbiological culture yielded negative results. Cells adherent to glass coverslips were treated with commercially available dry cow therapy drugs containing active principles such as Gentamicin (M1), Cephalonium anhydrous (M2), Ampicillin (M3), Cloxacillin benzathine (M4) and Cephapirin benzathine (M5). Phagocytosis of Zymosan particles was evaluated. Mean phagocytosis indexes of cells treated with M2 (15.12 percent ± 16.22), M3 (6.02 percent ± 7.96), M4 (4.54 percent ± 5.45) and M5 (2.47 percent ± 4.64) were lower (p<0.001) than mean phagocytosis index of the control group (40.67 percent ± 19.68). Mean phagocytosis index of cells treated with M2 was greater (p<0.05) than those treated with M3, M4 and M5, whereas means of the latter three treatments were statistically similar. M1-treated cells did not adhere adequately to the cover slips, making it impossible to evaluate phagocytosis in this group. The results obtained enable the conclusion that drugs used affected milk phagocytes negatively. However, interference on somatic cell function is not the sole factor determining an unsuccessful dry period therapy, since the efficacy ...

Efeito de medicamentos indicados para a prevenção da mastite bovina no período seco sobre a função fagocítica in vitro de leucócitos do leite de caprinos / Effect of dry cow therapy products on the in vitro phagocytic function of goat milk leukocytes

O uso de medicamentos antimamíticos específicos para vacas no período seco é indicado para prevenção de infecções na lactação seguinte. Não obstante, a ação das células envolvidas no período de secagem tem fundamental importância para a involução da glândula mamária e seu restabelecimento para a lactação subseqüente. A indisponibilidade de tais medicamentos para uso em cabras tem resultado na extrapolação do uso de produtos recomendados para vacas sem que se considerem as particularidades e diferenças anátomo-fisiológicas entre as espécies bovina e caprina. O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência de cinco antimamíticos específicos para vacas secas sobre a função dos fagócitos provenientes de leite caprino. Para tal, fez-se o isolamento de células somáticas de 20 amostras de leite provenientes de 10 cabras lactantes, sem antecedentes de tratamento de mamite nos últimos 30 dias, sob condições higiênico-sanitárias de colheita e com resultados negativos ao cultivo microbiológico do leite. As células aderidas a lamínulas de vidro foram confrontadas com formulações contendo princípios ativos disponíveis no mercado como Gentamicina (M1), Cefalônio Anidro (M2), Ampicilina (M3), Cloxacilina Benzatínica (M4) e Cefapirina Benzatínica (M5). Avaliou-se, por microscopia, a fagocitose de partículas de Zymosan. As médias dos índices de fagocitose das células submetidas ao tratamento com M2 (15,12 por cento ± 16,22), M3 (6,02 por cento ± 7,96), M4 (4,54 por cento ± 5,45) e M5 (2,47 por cento ± 4,64) foram menores (p<0,001) que a média dos índices de fagocitose do grupo controle (40,67 por cento ± 19,68). A média dos índices de fagocitose das células submetidas ao tratamento com M2 foi maior (p<0,05) que as médias dos tratamentos com M3, M4 e M5 enquanto estas foram estatisticamente iguais entre si. As amostras celulares submetidas ao medicamento M1 exibiram adesão insuficiente ou ausente às lamínulas, inviabilizando a avaliação da fagocitose...

The use of specific anti-mastitis drugs is indicated in dry cow therapy to prevent infections in the following lactation. Nonetheless, cells active in the dry period are of fundamental importance for the involution of the mammary gland and its recovery for the following lactation. Since there are no specific drugs for dry goat therapy, the dry cow therapy drugs tend to be misused in goats despite of the anatomical and physiological differences apart from the particularities of the two species. The objective of the present study was to evaluate the influence of five drugs specific for dry cow therapy on the function of goat milk phagocytes. Somatic cells were isolated from 20 milk samples of 10 lactating goats that had not been treated for mastitis during the previous 30 days. Milk samples were collected properly and microbiological culture yielded negative results. Cells adherent to glass coverslips were treated with commercially available dry cow therapy drugs containing active principles such as Gentamicin (M1), Cephalonium anhydrous (M2), Ampicillin (M3), Cloxacillin benzathine (M4) and Cephapirin benzathine (M5). Phagocytosis of Zymosan particles was evaluated. Mean phagocytosis indexes of cells treated with M2 (15.12 percent ± 16.22), M3 (6.02 percent ± 7.96), M4 (4.54 percent ± 5.45) and M5 (2.47 percent ± 4.64) were lower (p<0.001) than mean phagocytosis index of the control group (40.67 percent ± 19.68). Mean phagocytosis index of cells treated with M2 was greater (p<0.05) than those treated with M3, M4 and M5, whereas means of the latter three treatments were statistically similar. M1-treated cells did not adhere adequately to the cover slips, making it impossible to evaluate phagocytosis in this group. The results obtained enable the conclusion that drugs used affected milk phagocytes negatively. However, interference on somatic cell function is not the sole factor determining an unsuccessful dry period therapy, since the efficacy...

Influência do uso da plasmaferese sobre o tempo de recuperação de caprinos doadores de sangue ou plasma / Influence of the plasmapheresis uses in the recovery time of blood or plasma donor goats

O objetivo desta pesquisa foi determinar a influência do uso da plasmaferese sobre o tempo de recuperação clínica e hematológica de caprinos doadores de sangue total ou plasma. Para tanto, foram utilizados 20 caprinos adultos e clinicamente sadios, distribuídos por dois grupos de dez animais cada, a saber: grupo controle (de animais doadores de sangue total não tratados) e grupo experimental (de animais doadores que foram tratados com a plasmaferese). Os caprinos foram selecionados e monitorados por meio de exames físicos (funções vitais) e complementares (hemograma, proteínas totais, albumina, globulinas, relação A:G, ureia, creatinina e hemoglobina livre no plasma) realizados nos seguintes momentos: imediatamente antes e após a doação de sangue: 12, 24, 72, 120, 240, 360, 480 e 720 horas após os procedimentos. Os resultados foram analisados com comparações dentro e entre os dois grupos nos diferentes momentos do estudo. As observações clínicas efetuadas durante o período de até 30 dias após a doação de 20% do volume sanguíneo total, com ou sem a realização da plasmaferese nos animais dos grupos estudados, não sofreram variações influenciadas por esses procedimentos. Observou-se significativa variação dos componentes do eritrograma, tendo o grupo experimental apresentado as melhores taxas de recuperação em função do tempo. Com base nos resultados obtidos, a aplicação da técnica da plasmaferese em caprinos mostrou-se eficiente como recurso para a otimização do tempo de recuperação dos valores do hemograma de animais doadores de plasma, não determinando hemólise durante o seu procedimento.

The objective of this study was to determine the influence of plasmapheresis on clinical and haematological recovery time of whole blood or plasma donor goats. For this, 20 clinically healthy adult goats were divided into two groups of ten animals each: control group (not-treated whole blood donor animals), and experimental group (donor animals which were treated with plasmapheresis). Goats were selected and evaluated through physical examination (vital functions) and complementary tests (complete blood counts, total proteins, albumin, globulin, albumin:globulin ratio, urea nitrogen, creatinine, and plasma free haemoglobin) were carried out at the following moments: immediately before and after blood donation, 12, 24, 72, 120, 240, 360, 480, and 720 hours after the procedures. Results were analysed comparing animals in and between both groups (at differents moments of the study). The clinical observations made during the period of 30 days after donation of 20% of total blood volume, with or without plasmapheresis in the animals of studied groups, were not influenced by these procedures. The results revealed significant variation of eritrogram components, showing the experimental group to have better recovery rates according to time. Based on the results obtained in the present study, plasmapheresis technique application in goats showed to be efficient as a resource to optimize recovery time of blood cell values of plasma donor animals, and did not cause hemolisis during its procedure.

Influence of refrigeration on blood gas analysis of caprine venous blood / Influência da refrigeração na análise hemogasométrica de sangue venoso caprino

Blood samples collected from 14 healthy, four month-old, male goats of mixed breed, weighting from 30 to 45 kg, were analyzed in order to evaluate the effect of refrigeration on blood gas analysis. Blood samples to be used in the blood gas analysis were collected in duplicates, using disposable needles and plastic syringes containing around 1,000 IU of sodium heparin. Unpreserved samples were kept at room temperature, between 23 and 25 ºC, and those to be kept in refrigeration temperatures were placed in styrofoam coolers containing three liters of cold water and three kilograms of ice, in order to keep temperatures between zero and 4 ºC. Blood gas analyses were carried out immediately after collection and after 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 and 24 hours. Storage at room temperature affected significantly the group of variables studied, except blood concentration of HCO3. When samples were kept under refrigeration, partial pressure of O2, CO2 and SO2 were significantly affected. The significant variation in mean values of these variables when compared with initial mean values was greater in samples kept at room temperature. Results for pH, HCO3 - and ABE in the refrigerated samples were stable for up to 24 hours of blood collection. It was concluded, therefore, that blood gas analysis of caprine venous blood may be safely carried out in up to six hours of blood collection, provided that samples are kept under adequate refrigeration.

Objetivando-se avaliar o efeito da refrigeração sobre o exame hemogasométrico, foram utilizados 14 caprinos machos, hígidos, mestiços, com cerca de quatro meses de idade e peso variando entre 30 e 45 kg. As amostras de sangue destinadas ao exame hemogasométrico foram coletadas em duplicata, utilizando-se agulhas descartáveis acopladas a seringas plásticas contendo cerca de 1000 UI de heparina sódica. As amostras não conservadas foram mantidas a temperatura ambiente, entre 23 e 25 ºC e aquelas destinadas à refrigeração foram acondicionadas em isopor contendo três litros de água gelada e três quilos de gelo, mantendo-se assim uma temperatura entre zero e 4 ºC. As análises hemogasométricas foram determinadas imediatamente após coleta e 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 e 24 horas após. Verificou-se efeito significativo da temperatura ambiente sobre o conjunto de variáveis, com exceção da concentração sanguínea de HCO3. Quanto às amostras mantidas sob refrigeração, verificou-se efeito significativo sobre a tensão parcial de O2 e CO2 e SO2; sendo que a variação significativa dos valores médios destas variáveis com os valores médios iniciais foram mais tardias em relação às amostras mantidas a temperatura ambiente. Os valores de pH, HCO3 e ABE das amostras refrigeradas mantiveramse estáveis até 24 horas após a colheita de sangue. Conclui-se, portanto, o exame hemogasométrico de sangue venoso de caprinos pode ser efetivado com segurança até seis horas após sua colheita, desde que mantidos sob refrigeração adequada.

Influência dos fatores sexuais e etários sobre a proteína total, fração albumina e atividade sérica de aspartato-aminotransferase e gama-glutamiltransferase de ovinos da raça Santa Inês / Influence of age and sex on total serum protein and albumin and aspartato-aminotransferas and gama-glutamiltransferase serum activities on Santa Inês sheep

O presente estudo estabelece valores de referência dos teores séricos de proteínas totais, albumina, AST e GGT em ovinos da raça santa Inês e avalia a interferência de fatores sexuais e etários sobre estas variáveis. Foram colhidas amostras de sangue de 161 ovelhas. O resultado encontrado para os valores padrões séricos foram 5,86 +0,96 g/dL para proteínas totais, 2,33+0,43 g/dL para albumina, 63,25+27,52 U/L para AST e 28,45+14,53 U/L para GGT. A análise dos resultados permite afirmar que os valores referentes à concentração sérica de albumina e à atividade sérica de AST sofrem influência de fatores sexuais e etários, e os valores referentes à atividade sérica de GGT sofrem influência somente de fatores etários. Não foram encontradas influências dos fatores sexuais e etários para os outros parâmetros estudados.

This work establishes reference values for serum protein and albumin and serum activities of AST and GGT of Santa Inês sheep and evaluates the sexual and age influence on these values. Blood samples were collected from 161 clinically healthy sheep. The results allowed to establish the following reference values 5,86 + 0,96 g/dL (P>0,05)for serum protein, 2,33+0,43 g/dL (P>0,05) for albumin, 63,25+27,52 U/L (P>0,05) for AST and 28,45+14,53 U/L (P>0,05)for GGT. The result’s analysis also allowed concluding that age and sex influence on albumin serum concentrations and AST serum activity and that GGT serum activity suffer age influence

Perfil bioquímico de algumas enzimas no plasma sangüíneo de potras da raça Brasileiro de Hipismo (BH) criadas em Colina, Estado de São Paulo / Biochemical profile of some plasmatic enzymes in BH (Brasileiro de Hipismo) filies bred Colina in São Paulo State

Com o propósito de avaliar o perfil bioquímico de algumas enzimas,em potras sadias da raça BH (Brasileiro de Hipismo), utilizaram-se380 amostras de plasma sangüíneo colhidas de 19 animais desde o nascimento até 24 meses de vida. Na análise dos resultados evidenciou-se que os valores médios das enzimas FA (fosfatase alcalina) e CK( creatina quinase) foram máximos entre o nascimento e 24 horas devida (FA-1995.50 UI/ ; CK-189.13UI/L), enquanto que para a LD(lactato desidrogenase) e GGT (gama glutamiltransferase) as maiores magnitudes ocorreram, respectivamente, entre 3 e 4 dias (LD-479.11UI/L) e aos 10 dias de idade (GGT-18.70UI/L). As FA, CK,LD e GGT, mostraram diminuições dos valores médios,respectivamente, até 6 meses (FA-323.50UI/L), 20 dias (CK-51UI/L), 19 meses (LD-214.00UI/L) e 4 meses (GGT-11.40UI/L)estabilizando-se a seguir, com pequenas variações. A atividade da AST (aspartato aminotransferase) que foi mínima logo após o nascimento (AST- 43.38UI/L), aumentou até os sete dias de vida(AST-110.89UI/L), e a seguir diminuiu progressivamente, com pequenas oscilações, até o final do estudo. Todas as enzimas avaliadas sofreram variações influenciadas pelo fator etário, particularmente no período inicial de vida dos animais estudados.

380 plasma samples were used with the purpose of evaluate the biochemical profile of some enzymes in healthy BH (Brasileiro deHipismo) fillies. These samples were collected from 19 animals since birth until 24 months of age. The results showed that the mean values of ALP (alkaline phosphatase) and CK (creatine kinase) were higher between birth and 24 hours of life (FA-1995.50 UI/; CK-189.13UI/L), where as for LD (lactate dehidrogenase) and GGT (gama glutamiltransferase) the highest values were, respectively, between 3 and 4 days (LD-479.11UI/L) and with 10 days of life (GGT-18.70UI/L). AP, CK, LD and GGT showed a reduction of the mean values,respectively, until 6 months (FA-323.50UI/L), 20 days (CK-51UI/L), 19 months (LD-214.00 UI/L) and 4 months (GGT-11.40UI/L)stabilizing with some oscillations. The activity of AST (aspartate aminotransferase) was minimal after birth (AST- 43.38UI/L) increased until the seventh day of life (AST-110.89UI/L) and next it diminished progressively with little oscillations until the end of the study. Allenzymes evaluated were influenced by age, particularly in the initial period of life of the animals studied.

Modelo de indução de diarréia osmótica em bezerros holandeses / Model for osmotic diarrhea in holstein calves

Com o objetivo de avaliar um protocolo de diarréia osmótica induzida, foram utilizados 18 bezerros hígidos, com idade entre oito e 30 dias de vida, e peso variando de 37 a 50kg. A diarréia e a desidratação foram induzidas por meio da administração de leite integral (16,5mL kg-1), sacarose (4g kg-1), espirolactona e hidroclorotiazida (2mg kg-1), a cada oito horas, durante dois dias. O exame físico e as coletas de sangue para determinações de componentes do hemograma, hemogasometria e de constituintes bioquímicos foram realizados em T0 (0h), T1 (24hi) e T2 (48hi). O protocolo de indução da diarréia obteve 100 por cento de eficiência, produzindo diarréia aquosa e desidratação intensa (13 por cento do peso corpóreo) acompanhadas de azotemia pré-renal, aumento nos valores do hematócrito, hemoglobina e proteína total, hipercalemia, hiperlactemia, hiperfosfatemia, acidose metabólica e diminuição do défict de volume plasmático e da pressão venosa central.

Eighteen health Holstein calves between 18 and 30 days old and 37 weighting 50kg (body weight - BW) were used to develop a model for inducing osmotic diarrhea in order to cause a status of dehydration. Thus, sucrose (4g kg BW-1) and spirolactone and hydrochlorothiazide (2mg g BW-1) were added to the whole milk (16.5mL kg-1) each 8h for two days. Physical examination and blood samples for hemogram, acid:base status and biochemical analysis were obtained at 0 (T0), 24h (T1) and 48h (T2). Watery diarrhea and severe dehydration (13 percent of the BW) were seen in all calves, followed by pre-renal azotemia, high values of hematocrit, hemoglobin and total protein levels, hiperkalemia, hyperlactemia, and hyperphosphatemia, metabolic acidosis and decreased plasma volume and central venous pressure.